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高效液相色谱系统的组成及工作原理
点击次数:56 发布时间:2019-09-20
  高效液相色谱仪的体系由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的活动相被高压泵打入体系,样品溶液经进样器进入活动相,被活动相载入色谱柱(固定相)内,因为样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复屡次的吸附-解吸的分配进程,各组分在移动速度上发生较大的不同,被别离成单个组分顺次从柱内流出,经过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
 
  高效液相色谱(highperformanceliquidchromatography,HPLC)也叫高压液相色谱(highpressureliquidchromatography)、高速液相色谱(highspeedliquidchromatography)、高别离度液相色谱(highresolutionliquidchromatography)等。是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引进了气相色谱理论而迅速开展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送活动相,故又称高压液相色谱。又因剖析速度快而称为高速液相色谱。
 
  高效液相色谱是目前应用较多的色谱剖析办法,高效液相色谱体系由活动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成,其整体组成类似于气相色谱,可是针对其活动相为液体的特点作出许多调整。HPLC的输液泵要求输液量稳定平稳;进样体系要求进样便利切换紧密;因为液体活动相粘度远远高于气体,为了减低柱压高效液相色谱的色谱柱一般比较粗,长度也远小于气相色谱柱。HPLC应用十分广泛,简直广泛定量定性剖析的各个领域。
 
  使用高效液相色谱仪时,液体待检测物被注入色谱柱,经过压力在固定相中移动,因为被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,经过检测器得到不同的峰信号,最后经过剖析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。高效液相色谱作为一种重要的剖析办法,广泛的应用于化学和生化剖析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有实质的不同,它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相,适于剖析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。
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